华为最常用的手机铃声 :分离小鼠脑胶质细胞的最常用的方法

综合目前查询到的太平洋在线xg111太平洋在线32项研究，大约25％选择了不加消化酶的机械解离法，纯化胶质细胞所需的去除髓鞘首选方法是xg111企业邮局Percoll华为最常用的手机铃声 。小胶质细胞群均定义为CD11b + CD45int细胞，在大多数研究的方案中应用了细胞死活染料

小鼠脑胶质细胞分离方法

•麻醉小鼠，经心脏灌注冷磷酸盐缓冲盐水 (PBS，pH 7.4)华为最常用的手机铃声 。 •分离小鼠的大脑并置于 2 mL 冰冷的 Hank 平衡盐溶液 (HBSS) 中，用手术刀将其机械解离成尽可能小。 •不加入任何酶，仅加入DMEM。低速离心样本并用 2 mL HBSS 清洗。 •接下来，使用刮刀对组织进行机械均质化，目的是将组织团块转化为细胞悬液。 •将细胞悬液通过70 µm细胞过滤器去除碎片。 •为确保充分收集细胞，用 1 mL HBSS 再清洗过滤器4次。 •最后，将细胞低速离心收集。

髓鞘清除方法

Percoll法

将Percoll溶于 10×HBSS 中，配制成3种不同浓度：30%(4 mL)、37%(4 mL) 和70%(4 mL)华为最常用的手机铃声 。

•前述细胞去除碎片后，将细胞转移到37%等渗 Percoll 溶液中，接着加入其它浓度的Percoll，按照如下浓度排列：底层是70%Percoll溶液，中间层是含细胞的37% Percoll溶液，顶层是30%Percoll溶液，最后在最上面加入2 mL HBSS华为最常用的手机铃声 。 •接着，以300 g 和18℃离心40 min。在18℃下进行离心，可确保 Percoll 梯度的密度保持完整。同样，为保护梯度，将 加速度设置为最小值，同时 禁用离心机上的制动设置。 •离心后，脱髓鞘细胞位于37%和70%Percoll 梯度之间的边界，而髓鞘位于管的顶部，也就是HBSS中。 •从37%和70%梯度界面收集脱髓鞘细胞，并用 6 mL HBSS洗涤两次，以除去剩余的Percoll。

分群结果

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标签： 鼠脑 胶质 细胞 分离 常用